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快速銅染蛋白染色試劑盒

快速銅染蛋白染色試劑盒

產品編號:RTD6207

產品規(guī)格:10次

數量
價格 ¥300

快速蛋白銅染試劑盒

產品編號

規(guī)格

運輸

RTD6207

10 T

RT

產品簡介:                                                    

本試劑采用以銅離子為基礎的負染色方法,用于SDS-PAGE或Native-PAGE電泳凝膠染色,不需要使用含有刺激性的甲醛和冰醋酸,實驗方便快速,可以在30 min左右完成,最低能夠檢測出2 ng的蛋白條帶,該方法不對蛋白質產生修飾作用,而且經過脫色液處理后,可以用于電洗脫或采用PAGE膠蛋白微量回收試劑盒(貨號:RTD8108)進行膠回收,以便進行質譜和測序分析等,也可以用其他染色方法(銀染或考染)對膠重新染色。

按照每次使用50 ml1×即用型染色液計算,本產品可以染色 8-10塊mini-PAGE(8×10cm)膠。

產品組成:

產品編號

產品名稱

規(guī)格

貯存

運輸

RTD6207-01

增強液(4×)

100 ml

4-8

RT

RTD6207-02

染色液(10×)

60 ml

4-8

RT

RTD6207-03

脫色液(10×)

100 ml

4-8

RT

-

說明書

1

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儲存條件

按照標簽溫度貯存,常溫運輸。開封后一年有效。

凝膠染色的操作步驟:

以下步驟以一塊1 mm厚度8×10cm的凝膠操作為例。

. 漂洗:

取出電泳后的 PAGE 凝膠,用超純水漂洗兩次,每次1分鐘。

. 前處理:

2.1 準備工作:將增強液(4×)用超純水稀釋4倍,配成1×增強液。

2.2 凝膠中加入50 ml 1×增強液,常溫搖床慢搖10分鐘。

. 漂洗:

棄增強液,用超純水漂洗凝膠兩次,每次10-20秒,至泡沫完全清除干凈。

注:漂洗時間不要太長,否則會導致染色效果下降。

. 染色:

4.1 準備工作:將染色液(10×)用超純水稀釋10倍,配成1×即用型染色液。

    注:染色液略成半渾濁狀態(tài)。

4.2凝膠中加入 50 ml 1×即用型染色液,搖床慢搖5-10分鐘,觀察結果:在黑色背景下,可見光觀察,蛋白條帶為棕褐色,無蛋白區(qū)域為藍綠色;可見光燈箱觀察(凝膠底部打光),蛋白質條帶反顯白色,無蛋白的膠區(qū)則為黃綠色。

. 漂洗:

棄染色液,超純水洗滌凝膠2次,每次搖床慢搖1分鐘。

注:凝膠可以在水中保存1-2周。

. 脫色:

6.1 準備工作:將脫色液(10×)用超純水稀釋10倍,配成1×即用型脫色液。

6.2 如需要進行蛋白切膠回收,將所需的蛋白質條帶切下,用超純水漂洗切下的凝膠一次;如凝膠需要考染或銀染實驗,直接用超純水漂洗整個凝膠一次。

6.3 棄水,凝膠中加入適量1×即用型脫色液覆蓋凝膠,搖床慢搖5分鐘,倒掉脫色液;

6.4 重復脫色步驟2次。脫色完全的標志是白色凝膠完全脫色為無色透明。

6.5 超純水漂洗凝膠兩次,進行后續(xù)實驗操作。

實驗示例:

4-20% RealPAGE Precast Gel

 

lane 1-5: BSA分別為1,2,3,4,5μg

 

M:RTD6149 10-250kD

 

lane 6: Bacterial Lysis

 

凝膠顯影后(脫色前)蛋白條帶在黑色背景下為藍綠色(左)

 

可見光燈箱觀察(凝膠底部打光),蛋白質條帶反顯白色(右)



 
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